La solución 1/2500 componentes animales de la tripsina libera la tripsina para la disociación de la célula
Solución recombinante de la tripsina (RTS)
Descripción
La solución recombinante de la tripsina, es una solución libre de la tripsina del animal-componente optimizada para la disociación de la célula. Se formula con la tripsina humana recombinante/la tripsina porcina expresadas en Escherichia Coli y refolded y purificadas por la cromatografía. La secuencia de tripsina humana recombinante es lo mismo que secuencia humana de la tripsina 2.
Método de uso
El paso 1. vierte la solución tampón de 1 ml en el tubo del EP que contiene el polvo de la tripsina.
El paso 2. disuelve el polvo de la tripsina.
El paso 3. vierte la solución en el frasco que contiene la solución tampón y la mezcla. El mejor uso él en el plazo de 4 horas.
Notas
La nota 1. disocia las células adherentes bajo temperatura ambiente; el ℃ 37 no se recomienda.
La nota 2. en caso de necesidad, después de disolver, dispensa inmediatamente en conveniente; envases, entonces almacenados debajo de -20℃. Para utilizarlo, disuélvalo en la temperatura ambiente.
Nota 3. El contenido de la tripsina es 2000 BAEE unit/ml según lo arriba preparado. En caso de necesidad, diluya lo a 1000 unit/ml u otros basados en sus resultados experimentales.
Instrucciones para el uso
Las instrucciones siguientes son aplicables para la mayoría de las variedades de células. Los procedimientos y las concentraciones reales se deben determinar por la experiencia con variedades de células individuales (véase las notas abajo).
1. Lave las células con DPBS sin el Ca, magnesio (no. 02-023-1 del gato).
2. Añada 1ml de la solución recombinante de la tripsina a cada frasco de cultura del tejido T-25.
3. Incube el frasco en 37°C para 2 mínimos o más de largo cuanto sea necesario. Verifique la separación de la célula usando el microscopio invertido.
4. Granule las células por la centrifugación, y deseche el sobrenadante. 6. suspenda de nuevo las células en medio del crecimiento, y la semilla según lo deseado.
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